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口腔科学论文_负载TGF-β_3及BMSCs的Pluronic

来源:中国组织工程研究 【在线投稿】 栏目:期刊导读 时间:2021-10-25
作者:网站采编
关键词:
摘要:文章摘要:目的 制备负载TGF-β 3 及BMSCs的Pluronic F-127复合凝胶,观察其体内、外成骨及成血管作用。方法 取新西兰大白兔胫骨及股骨骨髓,分离培养BMSCs并传代,取第3代细胞经成骨、成脂

文章摘要:目的 制备负载TGF-β3及BMSCs的Pluronic F-127复合凝胶,观察其体内、外成骨及成血管作用。方法 取新西兰大白兔胫骨及股骨骨髓,分离培养BMSCs并传代,取第3代细胞经成骨、成脂诱导培养鉴定后用于后续实验。采用L-DMEM培养基溶解Pluronic F-127粉末、TGF-β3,分别制备Pluronic F-127凝胶、TGF-β3+Pluronic F-127凝胶、BMSCs+Pluronic F-127凝胶、TGF-β3+BMSCs+Pluronic F-127凝胶。取第3代BMSCs,分别采用L-DMEM培养基(A组)、成骨诱导液(B组)、含Pluronic F-127凝胶的成骨诱导液(C组)、含TGF-β3+Pluronic F-127凝胶的成骨诱导液(D组)培养14 d后,ALP染色和茜素红染色观测成骨情况;另采用含Pluronic F-127凝胶的L-DMEM培养基(实验组)、L-DMEM培养基(对照组)培养1、2、3、4 d,MTT法检测细胞增殖情况。取10只新西兰兔制备上颌窦提升模型后,于每只兔骨缺损处注入Pluronic F-127凝胶(A组)、TGF-β3+Pluronic F-127凝胶(B组)、BMSCs+Pluronic F-127凝胶(C组)、TGF-β3+BMSCs+Pluronic F-127凝胶(D组),于第8周取材行影像学检查、HE染色观察新骨形成情况,免疫组织化学染色观察骨组织VEGF及BMP-2表达情况,Western blot检测骨组织VEGF、抑瘤素M(oncostatin M,OSM)及BMP-4蛋白表达。结果 成骨、成脂诱导鉴定示分离培养细胞为BMSCs。体外实验染色显示D组ALP活性及茜素红浓度高于其他组(P<0.05);MTT法检测示随着时间延长,两组吸光度(A)值均逐渐升高,各时间点组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。体内实验影像学检查示D组成骨密度及成骨连续性最好,新骨体积占比优于其他组(P<0.05);HE染色示与其他组比较,D组骨小梁致密且排列规则,其上分布大量成骨细胞和破骨细胞,可见大量新骨形成;免疫组织化学染色示D组BMP-2、VEGF呈强阳性表达(P<0.05);Western blot检测D组VEGF、OSM及BMP-4蛋白相对表达量高于其他组(P<0.05)。结论 负载TGF-β3及BMSCs的Pluronic F-127复合凝胶中的BMSCs能被诱导分化为成骨细胞,并且复合凝胶对细胞无毒性,在兔上颌窦内有明显成骨及成血管效果。

文章关键词:

论文分类号:R783.1

文章来源:《中国组织工程研究》 网址: http://www.zgzzgcyj.cn/qikandaodu/2021/1025/1875.html



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